Desenvolvimento da CEL: equipamento de baixo-custo para reação e leitura de ensaios LAMP - Loop-mediated Isothermal Amplification

Autores

  • Felipe Gomes Naveca Fiocruz Amazônia
  • Valdinete Alves do Nascimento Fiocruz Amazônia
  • Victor Costa de Souza Fiocruz Amazônia
  • Dana Cristina da Silva Monteiro Fiocruz Amazônia
  • Arlesson Viana da Silva Fiocruz Amazônia
  • Carlos Raimundo Pereira dos Santos-Junior Instituto SENAI de Inovação em Microeletrônica
  • Thiago Daniel de Oliveira Moura Instituto SENAI de Inovação em Microeletrônica, Manaus
  • Valtemar Fernandes Cardoso Instituto SENAI de Inovação em Microeletrônica, Manaus

DOI:

https://doi.org/10.51723/ccs.v28i01.109

Resumo

O sistema de saúde brasileiro é constituído por um conjunto de ações e serviços que prestam assistência a população por meio de estratégias que visam a promoção, proteção e recuperação da saúde. Um dos pontos de maior destaque é a prevenção, na qual incluemse o diagnóstico e o tratamento precoce das doenças. A detecção e a identificação clássica de patógenos baseiam-se na microscopia e cultura, entretanto a baixa sensibilidade; a necessidade de profissionais capacitados e de infraestrutura adequada resultam, em alguns casos, na falha do diagnóstico e no atraso para o início do tratamento. Objetivo: desenvolver um equipamento para realização de ensaios LAMP (Loop Mediated Isothermal Amplification) em ambientes com reduzida infraestrutura laboratorial. Resultados: Foram padronizados protocolos para cinco importantes doenças encontradas na região amazônica: tuberculose, malária, dengue e as febres mayaro e oropouche para utilização na CEL, equipamento portátil para a realização dos ensaios LAMP. O equipamento possui detecção fotométrica integrada, com capacidade de oito reações simultâneas, detectando a alteração da cor nas reações positivas. O resultado é mostrado em um display alfanumérico, de fácil leitura, mesmo para pessoas sem experiência com a técnica. Os resultados também podem ser transferidos por bluetooth para um smartphone, onde é possível, com o aplicativo próprio fazer a visualização gráfica. Conclusão: por se tratar de um equipamento de baixo-custo, desenvolvido para a aplicação em diagnóstico molecular, pode representar uma alternativa para ampliação da oferta de diagnóstico molecular nos serviços da rede básica de saúde, permitindo maior acesso da população, mesmo em áreas remotas.

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Referências

1. Santos NRD. Desenvolvimento do SUS, rumos estratégicos e estratégias para visualização dos rumos. Ciência & Saúde Coletiva. ABRASCO - Associação Brasileira de Saúde Coletiva; 2007 Apr;12(2):429–35.
2. Galluzzi L, Magnani M, Saunders N, Harms C, Bruce IJ. Current molecular techniques for the detection of microbial pathogens. Sci Prog. 2007;90(Pt 1):29–50.
3. Gomes Naveca F, Sabidó M, Amaral Pires de Almeida T, Araújo Veras E, Contreras Mejía MDC, Galban E, et al. Etiology of genital ulcer disease in a sexually transmitted infection reference center in Manaus, Brazilian Amazon. Tang J, editor. PLoS ONE. Public Library of Science; 2013;8(5):e63953.
4. Woodford N, Sundsfjord A. Molecular detection of antibiotic resistance: when and where? J Antimicrob Chemother. 2005 Aug;56(2):259–61.
5. Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, Amino N, et al. Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res. Oxford University Press; 2000 Jun 15;28(12):E63.
6. Nagamine K, Hase T, Notomi T. Accelerated reaction by loop-mediated isothermal amplification using loop primers. Mol Cell Probes. 2002 Jun;16(3):223–9.
7. Mori Y, Notomi T. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): a rapid, accurate, and cost-effective diagnostic method for infectious diseases. J Infect Chemother. 2009 Apr;15(2):62–9.
8. Nie X. Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification of DNA for Detection of Potato virus Y. Plant Disease. The American Phytopathological Society; 2005 Jun;89(6):605–10.
9. Tomita N, Mori Y, Kanda H, Notomi T. Loopmediated isothermal amplification (LAMP) of gene sequences and simple visual detection of products. Nat Protoc. 2008;3(5):877–82.
10. Gurukumar KR, Priyadarshini D, Patil JA, Bhagat A, Singh A, Shah PS, et al. Development of real time PCR for detection and quantitation of Dengue Viruses. Virol J. BioMed Central Ltd; 2009;6(1):10.
11. Naveca FG, Nascimento VAD, Souza VC de, Nunes BTD, Rodrigues DSG, Vasconcelos PFDC. Multiplexed reverse transcription real-time polymerase chain reaction for simultaneous detection of Mayaro, Oropouche, and Oropouche-like viruses. Mem Inst Oswaldo Cruz. Fundação Oswaldo Cruz; 2017 Jul;112(7):510–3.
12. Teoh B-T, Sam S-S, Tan K-K, Johari J, Danlami MB, Hooi P-S, et al. Detection of dengue viruses using reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification. BMC Infect Dis. BioMed Central Ltd; 2013;13(1):387.
13. Balne PK, Barik MR, Sharma S, Basu S. Development of a loop-mediated isothermal amplification assay targeting the mpb64 gene for diagnosis of intraocular tuberculosis. J Clin Microbiol. American Society for Microbiology; 2013 Nov;51(11):3839–40.
14. Han E-T, Watanabe R, Sattabongkot J, Khuntirat B, Sirichaisinthop J, Iriko H, et al. Detection of four Plasmodium species by genus- and species-specific loop-mediated isothermal amplification for clinical diagnosis. J Clin Microbiol. 2007 Aug;45(8):2521–8.
15. Goto M, Honda E, Ogura A, Nomoto A, Hanaki K-I. Colorimetric detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by using hydroxy naphthol
blue. BioTechniques. 2009 Mar;46(3):167–72.
16. Ferreira MU, Castro MC. Challenges for malaria elimination in Brazil. Malar J. 3rd ed. BioMed Central; 2016 May 20;15(1):284.

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Publicado

29.01.2018

Como Citar

1.
Naveca FG, Nascimento VA do, Souza VC de, Monteiro DC da S, Silva AV da, Santos-Junior CRP dos, Moura TD de O, Cardoso VF. Desenvolvimento da CEL: equipamento de baixo-custo para reação e leitura de ensaios LAMP - Loop-mediated Isothermal Amplification. Com. Ciências Saúde [Internet]. 29º de janeiro de 2018 [citado 4º de maio de 2024];28(01):31-5. Disponível em: https://revistaccs.escs.edu.br/index.php/comunicacaoemcienciasdasaude/article/view/109

Edição

Seção

Clínica Assistencial